免疫熒光技術服務免疫熒光技術服務(DH0014)一、服務介紹免疫熒光技術(Immunofluorescencetechnique)又稱熒光抗體技術,是標記免疫技術中發(fā)展*早的一種。將抗原或抗體用熒光素進行標記,標記的抗原或標記的抗體與相應的抗體或抗原反應后,測定復合物中的熒光素,這種免疫技術稱為免疫熒光素技術。免疫熒光細胞化學分直接法、夾心法、間接法和補體法。二、服務內(nèi)容及價格服務編號服務內(nèi)容服務價格服務周期(工作日)DH0014-01免疫熒光單標記檢測咨詢咨詢DH0014-02免疫熒光雙標記檢測咨詢咨詢?nèi)?、客戶提?、細胞株或細胞爬片。注:細胞爬片不宜太密;2、熒光檢測所用的抗體3、實驗前,客戶需告知具體的細胞處理方式及詳細要求。注:若有特殊處理的樣品,請盡可能出示相關材料(具有保密性的材料除外)。四、服務流程免疫熒光單標記方法免疫熒光單標記是指只標記一種蛋白質(zhì)分子,方法比較簡單,只要按照染色步驟去做,通常不存在太多的問題。但要注意固定液的選擇,固定液選擇的合適與否,可能會直接影響染色結果。具體染色方法如下。1、所需材料與試劑a,培養(yǎng)在蓋玻片或玻璃培養(yǎng)皿中融合程度達到60%-70%的細胞。b,一抗、FITC或TRITC標記的二抗。c。上海東寰向您介紹EdU細胞增殖檢測試劑盒的好處。湖南如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒購買
EdU檢測方法更快速、更靈敏、更準確。EdU檢測染料只有BrdU抗體大小的1/500,在細胞內(nèi)很容易擴散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等)即可有效檢測,可有效避免樣品損傷,在細胞和組織水平能更準確地反映細胞增殖等現(xiàn)象。EdU染色(a)通過用10:1去離子水稀釋10x反應緩沖液進行配制1xEdU反應緩沖液;(b)按照溶解200mg緩沖添加劑溶于1ml去離子水的比例稱取適量的粉末進行溶解,即為可用的緩沖添加劑的濃度,建議現(xiàn)用現(xiàn)配;注:緩沖添加劑為白色粉末,較難準確稱量,稱量范圍可稍微放寬,但是不應超過±20%,且該粉末較易氧化,使用后請旋緊管蓋,如試劑出現(xiàn)棕黃色,則需報廢或更換福建EdU細胞增殖檢測試劑盒供應商EdU細胞增殖檢測試劑盒的運用領域有哪些?
EdU細胞增殖檢測試劑盒穩(wěn)定:適用于對細胞增殖狀況的連續(xù)觀察●經(jīng)濟:無需裂解細胞,細胞可繼續(xù)培養(yǎng)或用于其他實驗●可靠:文獻引用率高,Pubmed有上千篇文獻的引用AlamarBlue®的應用●監(jiān)測細胞的生長增殖狀態(tài)、研究細胞周期、細胞凋亡●監(jiān)測生長因子活性,評估生長因子對細胞增殖的影響●物尤其是藥物的開發(fā)●環(huán)境污染物質(zhì)的評估,細胞毒分析●效價評估細胞增殖過程中,細胞體內(nèi)的環(huán)境由氧化環(huán)境變化成還原環(huán)境,呼吸鏈中的NADPH/NADP,FADH/FAD,FMNH/FMN和NADH/NAD的比值升高。alamarBlue®的活性成分resazurin(刃天青)是一種無毒、可透膜的藍色染料,有微弱的熒光性
搖床孵育5分鐘,以中和過量的多聚甲醛;(c)棄甘氨酸溶液,每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;(d)每孔加入300ulTritonX-100細胞通透液,室溫通透10分鐘,棄細胞通透溶液;(e)每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;染色反應液組分500ul1ml2ml5mlIX反應緩沖液430ul860ulmlml催化劑溶液20ul40ul80ul200ulTAMRA紅色熒光溶液ulul5ulul緩沖添加劑50ul100ul200ul500ul(d)每孔加入100ul配置好的檢測混合液,以覆蓋細胞為宜,避光、室溫孵育30分鐘。(e)棄染色反應液,加入300ulTritonX-100細胞滲透液清洗2-3次,每次10分鐘;(f)棄細胞滲透液,用PBS洗兩次,每次5分鐘。DNA染色(a)將Hoechst33342用PBS溶液1:1000進行稀釋得到終濃度為5ug/ml的lxHoechst染色液;(b)每孔加入300ul1xHoechst染色液,室溫避光孵育20-30分鐘后,棄染色液;(c)每孔加入300ulPBS洗細胞兩次,去掉洗液。上海哪家EdU細胞增殖檢測試劑盒值得信賴?
EdU(5-Ethynyl-2’-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,能夠在細胞增殖時期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在復制的DNA分子中,通過基于EdU與Apollo熒光染料的特異性反應快速檢測細胞DNA復制活性,適用于細胞增殖、細胞分化、生長與發(fā)育、DNA修復、病毒復制、細胞標記示蹤等方面的研究,尤其適合進行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實驗。與BrdU檢測方法相比,EdU檢測方法更快速、更靈敏、更準確。EdU染料只有BrdU抗體的1/500,在細胞內(nèi)很容易擴散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應,能在細胞和組織水平更準確地反映DNA復制活性。EdU細胞增殖檢測試劑盒,有哪些好處值得選擇?河南咨詢EdU細胞增殖檢測試劑盒說明書
EdU細胞增殖檢測試劑盒對如今市場的影響。湖南如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒購買
EdU細胞增殖檢測試劑盒通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應,把熒光集團標記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣就可以進行高效快速的檢測出DNA復制活性,廣泛應用于細胞增殖、細胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復等方面的研究。傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法需要DNA變性、抗原修復、抗原抗體過夜孵育等復雜繁瑣的操作步驟。而EdU檢測方法不需要劇烈的DNA變性,只需溫和的細胞固定化和透化處理,能夠較好地保護細胞形態(tài)、DNA整體結構及細胞內(nèi)抗原識別位點,操作步驟更加快速、靈敏和準確。EdU與胸腺嘧啶(T)結構非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細胞內(nèi)很容易擴散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應,能在細胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復制活性湖南如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒購買