培養(yǎng)基的制備原則和要求:培養(yǎng)基是根據(jù)各類微生物生長繁殖的需要,用人工方法把多種物質(zhì)混合而成的營養(yǎng)物。一般用來分離、培養(yǎng)菌類。常用的培養(yǎng)基有基礎培養(yǎng)基、增菌培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基和厭氧培養(yǎng)基。在制備培養(yǎng)基時,應掌握如下原則和要求:(一)培養(yǎng)基必須含有細菌生長繁殖所需要的營養(yǎng)物質(zhì)。所用的化學藥品必須純凈,稱取的份量務必準確。(二)培養(yǎng)基的酸堿度應符合細菌生長要求。按各種培養(yǎng)基要求準確測定調(diào)節(jié)pH值。多數(shù)細菌生長的適宜pH值為7.2~7.6,呈弱堿性。投資一臺高性能制備器可明顯降低實驗失敗率,長期節(jié)省時間和成本。遼寧培養(yǎng)基制備器定制
培養(yǎng)基制備技術(shù):一、玻璃器皿的清洗:在制備培養(yǎng)基的過程中,首先要使用一些玻璃器皿,如試管、三角瓶、培養(yǎng)皿、燒杯和吸管等。這些器皿在使用前都要根據(jù)不同的情況,經(jīng)過一定的處理,洗刷干凈。有的還要進行包裝,經(jīng)過滅菌等準備就緒后,才能使用。1、新購的玻璃器皿:除去包裝沾染的污垢后,先用熱肥皂水刷洗,流水沖凈,再浸泡于1~2%的工業(yè)鹽酸中數(shù)小時,使游離的堿性物質(zhì)除去,再以流水沖凈。對容量較大的器皿,如大燒瓶、量筒等,洗凈后注入濃鹽酸少許,轉(zhuǎn)動容器使其內(nèi)部表面均沾有鹽酸,數(shù)分鐘后傾去鹽酸,再以流水沖凈,倒置于洗滌架上將水空干,即可使用。2、用過的玻璃器皿:凡確無病原菌或未被帶菌物污染的器皿,使用后可隨時沖洗,吸取過化學試劑的吸管,可先浸泡于清水中,待到一定數(shù)量后再集中進行清洗。有可能被病原菌污染的器皿,必須經(jīng)過適當消毒后,將污垢除去,用皂液洗刷,再用流水沖洗干凈。湖南培養(yǎng)基制備器液體溢出報警需檢查容器裝載量是否超標。
如何避免沉淀物的產(chǎn)生:在使用血清的時候,注意下列的操作:①解凍血清時,請按照的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃),非常容易產(chǎn)生沉淀物。②解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。③勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,而影響血清的質(zhì)量。④血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。⑤若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。
分裝:配制好的培養(yǎng)基根據(jù)不同的用途分裝在三角瓶、試管等容器中,分裝試管,如果試管量很大,可用自動分液器。如果試管量少,可用漏斗分裝。分裝量不超過容器容積的三分之二。三角瓶以不超過容積的二分之一為宜;瓊脂斜面以不超過試管長度的五分之一為宜,滅菌后,擺成的斜面為培養(yǎng)基的三分之一、底層為三分之二的量為宜;半固體瓊脂分裝量為試管長度的的三分之一;用來接種或保菌的高層瓊脂,分裝量為試管長度的四分之一或三分之一,用來接種厭氧菌的要達到三分之二;瓊脂平板,內(nèi)徑90mm的以13ml~15ml為宜,內(nèi)徑70mm的平板為8ml~10ml,制成的瓊脂平板。**小規(guī)模實驗室**:選擇帶高效加熱/冷卻功能的臺式培養(yǎng)基制備儀。
培養(yǎng)基的分裝,應按使用的目的和要求,分裝于試管、燒瓶等適當容器內(nèi)。分裝量不得超過容器裝盛量的2/3。容器口可用墊有防濕紙的棉塞封堵,其外還須用防水紙包扎(現(xiàn)試管一般多有用螺旋蓋者)。分裝時較好能使用半自動或電動的定量分裝器。分裝瓊脂斜面培養(yǎng)基時,分裝量應以能形成2/3底層和1/3斜面的量為洽當。分裝容器應預先清洗干凈并經(jīng)干烤消毒,以利于培養(yǎng)基的徹底滅菌。每批培養(yǎng)基應另外分裝20ml培養(yǎng)基于一小玻璃瓶中,隨該批培養(yǎng)基同時滅菌,以為測定該批培養(yǎng)基較終pH之用。Systec培養(yǎng)基制備器采用模塊化設計,適配多種培養(yǎng)基類型需求。福建觸摸屏培養(yǎng)基制備器
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液體培養(yǎng)基,固體培養(yǎng)基的對應詞,是微生物或動植物細胞的液狀培養(yǎng)基。它具有進行通氣培養(yǎng)、振蕩培養(yǎng)的優(yōu)點。在靜止的條件下,在菌體或培養(yǎng)細胞的周圍,形成透過養(yǎng)分的壁障,養(yǎng)分的攝入受到阻礙。由于在通氣或在振蕩的條件下,可消除這種阻礙以及增加供氧量,所以有利于細胞生長,提高生產(chǎn)量。培養(yǎng)基的配制:配料:配方換算→在容器中加入少量水→按照配方稱取各種藥品,依次加入→加足所需水量一藥一勺,取藥后立即蓋上瓶蓋。溶解:淀粉溶解:少量冷水調(diào)成糊狀,加熱溶解,特別是加有瓊脂的培養(yǎng)基,一定要煮沸,瓊脂的熔解溫度95~97℃,且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。調(diào)PH:用1N的鹽酸或的1NNaOH把培養(yǎng)基調(diào)節(jié)到所要求的值。過濾:濾紙或棉花進行過濾。遼寧培養(yǎng)基制備器定制