酶標(biāo)儀在用單波長測定吸光度時,除受到測定干擾(樣本的濁度、干擾色等)和電路干擾(包括噪音、漂移、電壓等)等因素外,受液體表面張力的影響也很大。在檢測過程中,由于液體表面張力的作用,液體的表面不是一個平面,而是形成一個凹面,從側(cè)面看似凹透鏡,這樣不可避免會影響光路的正常通過。由于凹液面的影響,光線在通過液體時,除正常被液體吸收一部分外,尚有部分被折射和反射(如光線通過凹透鏡那樣),影響吸光度的檢測。而酶標(biāo)儀使用的又是通過光導(dǎo)纖維傳播的點光源,如果每次能在同一部位檢測,吸光度的重復(fù)性將得到保證,但由于機械運動等造成的誤差,不可能保證每孔都在相同部位被檢測,因此造成了孔與孔之間有一定的差異。微孔板是一種經(jīng)事先包埋適用于放置待測樣本的透明塑料板。遼寧操作簡便酶標(biāo)儀廠家直銷
選擇酶標(biāo)儀的檢測波長:
405nm:ELISA檢測,底物是PNPP;
405-420:ELISA檢測,底物是ABTS;
450nm:
1. 科研應(yīng)用:
細胞增殖檢測CCK-8;ELISA檢測,底物是TMB;
ELISA檢測,底物是OPD(pH5.0,OPD比較**長450;pH1.0,OPD比較**長492);
2. 醫(yī)療應(yīng)用:
丙肝、乙肝檢測;HIV檢測;甲胎蛋白的測定AFP(肺免疫學(xué)檢測);CA15-3(乳腺的測定);單純皰病毒的檢測等等。
3. 農(nóng)業(yè)檢測:
動物疫病檢測,禽類疫病檢測;
4. 食品與環(huán)境安全:
檢測,獸藥殘留檢測,添加劑檢測,檢測。
490nm:細胞增殖檢測MTT;
540nm:一氧化氮(NO)檢測;
562nm:蛋白質(zhì)濃度測定(BCA);
595nm:蛋白質(zhì)濃度測定(考馬斯亮藍染色);
重慶酶標(biāo)儀試用酶標(biāo)儀是一種用途比較廣的生物檢驗醫(yī)療設(shè)備,利用酶聯(lián)免疫分析法,根據(jù)酶標(biāo)記原理,進行定性或定量分析。
酶標(biāo)儀與分光光度計區(qū)別:
(2)光路的方向:分光光度計是水平光路,而酶標(biāo)儀則是垂直光路。由于酶標(biāo)板盛樣本的塑料微孔板是多排多孔的,光線只能垂直穿過,因此酶標(biāo)儀的光束都是垂直通過待測溶液和微孔板的,光束既可是從上到下,也可以是從下到上穿過比色液。垂直光的特點是標(biāo)本吸光度受液體濃縮或稀釋的影響小,不足之處是受被測樣本液面是否水平、酶標(biāo)板透光性、孔底是否平整等的影響較大。
(3)光路的長度:由于光密度(OD值)與吸光系數(shù), 待測組分的濃度以及光路長度成正比關(guān)系。分光光度計采用的比色杯的寬度通常是25px,所以光路長度固定為25px。因此不同儀器,不同批次測量的數(shù)據(jù)具有同樣的可比性。而酶標(biāo)儀采用的是垂直光路, 所以光路的長度應(yīng)該是液體液面的高度,所以測得的值受到樣品的體積的影響。
酶標(biāo)儀有單波長和雙波長檢測功能。有時使用者不知在什么情況下使用單或雙波長檢測。所謂的“單波長”就是使用一種對顯色具比較大吸收的波長即450 nm或492 nm進行比色測定;而“雙波長”則除了用對顯色具比較大吸收的波長即450 nm或492 nm進行比色測定外,同時用對特異顯色不敏感的波長如630 nm進行測定,酶標(biāo)儀打印出來的吸光度則為二者之差。630 nm波長下得到的吸光度是非特異的,來自于板孔上諸如指紋、灰塵、臟物等所致的吸收。因此,在ELISA比色測定中,比較好使用雙波長,且不必設(shè)空白孔。光柵酶標(biāo)儀是用光柵進行分光,光源發(fā)出的全波譜光線經(jīng)過光柵后,就可以獲得任意波長的光。
酶標(biāo)儀測量原理:光學(xué)測量。
K3 Plus酶標(biāo)儀采用的是上海寶予德科學(xué)儀器有限公司傳統(tǒng)的垂直測光理念,即光束穿過整個樣品。在垂直測光中,吸光度與孔板中吸光物質(zhì)的數(shù)量成比例。
垂直光路測量的優(yōu)點:
1. 對非吸光液體物質(zhì)的不正確的移液不影響測量的吸光值。
2. 反應(yīng)過程中非吸光液體物質(zhì)的揮發(fā)不影響測量的吸光值。
3. 溶液中存在某程度的非均一性,例如濁度測量中的分層現(xiàn)象,不會對測量結(jié)果造成影響。
光學(xué)系統(tǒng)包括以下部件:石英鹵素?zé)?、斬光輪、孔徑透鏡與聚光透鏡、半透明反射鏡、孔徑、干涉濾光片(濾光片輪)、光纖束、聚焦透鏡、上透鏡與檢測器。
酶標(biāo)儀檢測單位用OD值表示, OD是光密度的意思,表示被檢測物吸收掉的光密度。吉林性能穩(wěn)定酶標(biāo)儀檢驗
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熒光酶標(biāo)儀原理:
由光源氙弧燈發(fā)出的光通過切光器使其變成斷續(xù)之光以及激發(fā)光單色器變成單色光后,此光即為熒光物質(zhì)的激發(fā)光,被測的熒光物質(zhì)在激發(fā)光照射下所發(fā)出的熒光,經(jīng)過單色器變成單色熒光后照射于測樣品用的光電倍增管上,由其所發(fā)生的光電流經(jīng)過放大器放大輸至記錄儀,激發(fā)光單色器和熒光單色器的光柵均由電動機帶動的凸輪所控制,當(dāng)測繪熒光發(fā)射光譜時,將激發(fā)光單色器的光柵,固定在適當(dāng)?shù)募ぐl(fā)光波長處,而讓熒光單色器凸輪轉(zhuǎn)動,將各波長的熒光強度訊號輸出至記錄儀上,所記錄的光譜即發(fā)射光譜。
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