包括臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞、脂肪干細(xì)胞、皮膚成纖維細(xì)胞、軟骨細(xì)胞等各種細(xì)胞的原代培養(yǎng)。本人從2014年研究生畢業(yè)后在一家干細(xì)胞公司從事干細(xì)胞項(xiàng)目研發(fā)工作5年以上,擁有5年以上各種細(xì)胞如臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞、脂肪干細(xì)胞、皮膚成纖維細(xì)胞的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)經(jīng)驗(yàn)。包括負(fù)責(zé)人...
外泌體生物發(fā)生和神經(jīng)元細(xì)胞中分泌小泡的調(diào)節(jié)之間的交集為外泌體和神經(jīng)退行性疾病的發(fā)病機(jī)制之間假定的聯(lián)提供了新的見(jiàn)解。與研究外泌體在其他疾病中的作用相比,外泌體中的研究進(jìn)展迅速,而且外泌體與的幾個(gè)主要特征有關(guān)。外泌體影響、生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移、副綜合征和耐藥性。外泌...
收藏查看我的收藏0有用+1已投票0細(xì)胞培養(yǎng)編輯鎖定本詞條由“科普中國(guó)”科學(xué)百科詞條編寫(xiě)與應(yīng)用工作項(xiàng)目審核。細(xì)胞培養(yǎng)(cellculture)是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境(無(wú)菌、適宜溫度、酸堿度和一定營(yíng)養(yǎng)條件等),使之生存、生長(zhǎng)、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種...
是決定培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵??梢栽诮臃N后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)3h到5h,待細(xì)胞貼壁后,再補(bǔ)足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。3、懸浮型原代細(xì)胞1)必須保持細(xì)胞的懸浮狀態(tài)??梢酝ㄟ^(guò)增加培養(yǎng)液的黏度來(lái)幫助細(xì)胞呈懸浮狀態(tài),如給培養(yǎng)液中加入低濃度的透明質(zhì)酸復(fù)合物。在有攪拌裝...
常見(jiàn)的有理染色、WesternBlot、PCR等),實(shí)驗(yàn)儀器是否需要預(yù)約使用。如果需要外送公司檢測(cè),需要提前聯(lián)系好商家,以及了解清楚樣本如何獲取,如何運(yùn)輸。飼養(yǎng)動(dòng)物及干預(yù)動(dòng)物購(gòu)買(mǎi)后需要將時(shí)間節(jié)點(diǎn)提前規(guī)劃好,比如,周需要做什么?測(cè)量體重?觀察飲食?測(cè)量需...
膿毒癥動(dòng)物模型必須具備以下基本要素:有膿毒癥典型的高排低阻血流動(dòng)力學(xué)表現(xiàn)和高代謝狀態(tài);伴發(fā)多個(gè)功能障礙;有較高的自然死亡率,根據(jù)膿毒癥的轉(zhuǎn)歸,要求動(dòng)物模型的自然死亡率達(dá)到50%~70%;膿毒癥是嚴(yán)重引起機(jī)體的炎癥反應(yīng)過(guò)度造成的自身?yè)p傷,不是細(xì)菌和內(nèi)對(duì)機(jī)...
準(zhǔn)備碎冰和。把膜置于甲醇溶液中活化1分鐘,然后轉(zhuǎn)移至轉(zhuǎn)膜液中平衡3分鐘后備用。2、轉(zhuǎn)膜組裝轉(zhuǎn)膜三明治夾,這一步很關(guān)鍵,重要的是膠和膜之間不能有氣泡且膜與膠要保證貼合緊密(否則會(huì)翻車(chē)),可以加多點(diǎn)轉(zhuǎn)膜液泡著。組裝好后加滿(mǎn)轉(zhuǎn)膜液,設(shè)置電源參數(shù),我習(xí)慣恒流轉(zhuǎn)...
中華文化促進(jìn)會(huì)文化創(chuàng)新與傳播委員會(huì)會(huì)長(zhǎng)朱建聲、西安海棠學(xué)院院長(zhǎng)馮居秦、西安交通大學(xué)人文學(xué)院EDP中心主任、中華風(fēng)采人物媒體社長(zhǎng)王天保、西安市EMBA助企商會(huì)會(huì)長(zhǎng)張西安、陜西省糖尿病協(xié)會(huì)副會(huì)長(zhǎng)張麗、陜西省養(yǎng)生協(xié)會(huì)會(huì)長(zhǎng)李靖、陜西省職業(yè)經(jīng)理人協(xié)會(huì)名譽(yù)會(huì)長(zhǎng)劉志...
導(dǎo)語(yǔ)原代細(xì)胞培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng),是建立細(xì)胞系的步,其步驟包括取材→分離→培養(yǎng)和維持,給大家?guī)?lái)原代細(xì)胞培養(yǎng)的一些技巧,希望大家能有所收獲!原代細(xì)胞培養(yǎng)原代細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用1、為研究生物體細(xì)胞的生長(zhǎng)、代謝、繁殖提供有力的手段;2、為傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件;3、服務(wù)...
注意事項(xiàng)1.病毒包裝的幾個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)主要包括:細(xì)胞因素、載體系統(tǒng)(盡量使用成熟的商業(yè)化載體系統(tǒng))、構(gòu)建重組的質(zhì)粒正確與否、質(zhì)粒抽提純化情況、包裝轉(zhuǎn)染控制(24、48小時(shí)的細(xì)胞及熒光狀態(tài)判斷)、目的基因?qū)Σ《景b影響(基因大小、序列情況、蛋白功能毒性等都會(huì)影...
本實(shí)用新型涉及細(xì)胞培養(yǎng)箱領(lǐng)域,尤其涉及的是一種新型原代細(xì)胞培養(yǎng)箱。背景技術(shù):現(xiàn)有技術(shù)中,原代培養(yǎng),是指由體內(nèi)取出組織或細(xì)胞進(jìn)行的培養(yǎng),也叫初代培養(yǎng)。原代培養(yǎng)離體時(shí)間短,遺傳性狀和體內(nèi)細(xì)胞相似,適于做細(xì)胞形態(tài)、功能和分化等研究。較為嚴(yán)格地說(shuō)是指成功傳代之...
包被)|不透明微孔板|微孔板蓋|微孔板封口|其它色譜柱空色譜柱|離子交換色譜柱|分子篩色譜柱|正相色譜柱|反相色譜柱|親和色譜柱|疏水作用色譜柱|特制色譜柱|色譜介質(zhì)離子交換色譜介質(zhì)|分子篩色譜介質(zhì)|親和色譜介質(zhì)疏水作用色譜介質(zhì)|羥基磷灰石色譜介質(zhì)|吸...
或者是還包括為這種過(guò)程、方法、物品或者設(shè)備所固有的要素。在沒(méi)有更多限制的情況下,由語(yǔ)句“包括一個(gè)……”限定的要素,并不排除在包括所述要素的過(guò)程、方法、物品或者設(shè)備中還存在另外的相同要素。以下結(jié)合實(shí)施例對(duì)本實(shí)用新型的特征和性能作進(jìn)一步的詳細(xì)描述。實(shí)施例1...
用伊紅乙醇液對(duì)比染色1~3min。(4)將切片放入95%乙醇中洗去多余的紅色,然后放入無(wú)水乙醇中3~5min,吸干后將切片放入二甲苯Ⅰ、Ⅱ中各3~5min。3、觀察在鏡下可見(jiàn)卵巢呈扁橢圓形,表面為單層扁平上皮細(xì)胞或單層立方上皮,卵巢實(shí)質(zhì)分為皮質(zhì)和髓質(zhì)。...
每15min搖晃一次,消化時(shí)間根據(jù)組織來(lái)定,約1-2h;5.待大部分組織塊消化成透明狀時(shí),用40μm的細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞,收集;6.用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。常見(jiàn)問(wèn)題解答:Q:為什么我取得原代織,分離的卻不是細(xì)胞?A:取材時(shí),我們要熟悉所需組織的類(lèi)型...
1.首要原則:細(xì)胞不重要情況下立即丟棄,培養(yǎng)箱滅菌,所用培養(yǎng)基也都要丟棄,器械等重新滅菌或拆用新的。2.細(xì)菌污染一般都救不回來(lái)了,發(fā)現(xiàn)的時(shí)候培養(yǎng)基一般都很渾濁且細(xì)胞都死了3.污染且細(xì)胞很重要時(shí):遇到念球菌污染,且細(xì)胞為基因改造細(xì)胞,非常重要。如231貼...
我們知道WB實(shí)驗(yàn)步驟繁瑣,一次實(shí)驗(yàn)歷時(shí)也不短,從提蛋白到顯影結(jié)束可能要三天,我們就講一下這里面的一些關(guān)鍵環(huán)節(jié)。一、蛋白提取及變性1、提取蛋白很多經(jīng)驗(yàn)豐富的WB實(shí)驗(yàn)者都深有體會(huì),蛋白提取是影響結(jié)重要的環(huán)節(jié)之一。該過(guò)程重要的是防降解和保證蛋白濃度不要太低。...
細(xì)胞檢測(cè)平臺(tái)可提供細(xì)胞增殖/細(xì)胞毒性、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期、細(xì)胞遷移/細(xì)胞侵襲等細(xì)胞學(xué)檢測(cè)技術(shù)服務(wù)。通過(guò)細(xì)胞學(xué)檢測(cè)可以對(duì)目的基因的生理功能及其相互作用進(jìn)行研究,是基礎(chǔ)科研及藥物研發(fā)中檢測(cè)物質(zhì)毒性、評(píng)估藥物安全性及有效性、的發(fā)生及增值等的重用手段。分子檢測(cè)...
一種是用beta巰基乙醇打開(kāi)蛋白質(zhì)分子二硫鍵的,另一種是用DTT(二硫蘇糖醇)。兩者的作用是一樣的,但特點(diǎn)不一樣,前者更容易與氧氣反應(yīng),穩(wěn)定性比后者差,如果在常溫下暴露在空中,前者只能維持24小時(shí)的活性,后者卻可以維持7天左右。所以該如何選擇?如果是蛋...
視實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩ǎ?jīng)過(guò)一定的處理(如消化分散細(xì)胞、分離等)后接入培養(yǎng)器皿中,這一過(guò)程稱(chēng)為取材。如是細(xì)胞株的擴(kuò)大培養(yǎng)則無(wú)取材這一過(guò)程。機(jī)體取出的組織細(xì)胞的培養(yǎng)稱(chēng)為原代培養(yǎng)。理論上講各種動(dòng)物和人體內(nèi)的所有組織都可以用于培養(yǎng),實(shí)際上幼體組織(尤其是胚胎組織)...
特發(fā)性肺纖維化(IPF)小鼠模型建立【方法】1、BALB/c小鼠麻醉,6-8周齡,體重20~25g,仰臥固定于實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,頸部去毛后酒精消毒,切開(kāi)皮膚,逐層暴露氣管;2、將1mL注射器經(jīng)兩氣管軟骨環(huán)間隙朝向心端刺入氣管,回抽無(wú)阻力;3、注入博萊霉素(約4...
制作該模型的方法為大鼠腹腔麻醉消毒后選取腹部正中切口打開(kāi)腹腔長(zhǎng)約2cm,尋找盲腸,小心分離其遠(yuǎn)端與大腸的系膜,在盲腸遠(yuǎn)端1/2處用無(wú)菌4號(hào)絲線緊緊結(jié)扎,并用無(wú)菌7號(hào)針頭在已結(jié)扎盲腸遠(yuǎn)端處貫通穿刺,然后把盲腸推回腹腔,關(guān)閉腹腔。影響因素多數(shù)研究一致認(rèn)為盲...
3)基因/蛋白質(zhì)表達(dá)定性或定量檢測(cè)在進(jìn)行分子檢測(cè)的過(guò)程中,保持核酸和蛋白質(zhì)的完整性至關(guān)重要,因此在取樣過(guò)程中,應(yīng)盡量避免核酸及蛋白質(zhì)的降解。如不注意采樣過(guò)程,將會(huì)導(dǎo)致樣本中的核酸及蛋白質(zhì)的無(wú)差別降解,嚴(yán)重影響后續(xù)分子檢測(cè)結(jié)果。在條件允許的情況下,樣本在...
盒內(nèi)有異丙醇,以保證溫度降低的速度),立即放入一80℃冰箱內(nèi),過(guò)夜,第二天放入液氮中,可以保存至少兩年,如不放入液氮,可以保存三個(gè)月。凍存液的配制:70%的完全培養(yǎng)基+20%FBS+10%,邊滴邊搖。[5]細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)編輯(1)次開(kāi)始培養(yǎng)某種細(xì)胞時(shí)...
磷酸緩沖鹽溶液),注射器,灌流針,移液槍?zhuān)囵B(yǎng)皿,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,無(wú)菌水。二、組織塊制備選擇符合實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理規(guī)范的方式處死動(dòng)物,將動(dòng)物浸泡在裝有70%醫(yī)用酒精的燒杯中數(shù)分鐘,用無(wú)菌剪暴露心臟,注射器吸取無(wú)菌pbs連接灌流針進(jìn)行心臟灌流以去除循環(huán)中的血液,對(duì)所...
用一次定量放血法可擺分之?dāng)[造成出血性休克,擺分之?dāng)[死亡,這就符合可重復(fù)性和達(dá)到了標(biāo)準(zhǔn)化要求。(三)可靠性復(fù)制的動(dòng)物模型應(yīng)該力求可靠地反映人類(lèi)疾病,即可特異地、可靠地反映某種疾病或某種功能、代謝、結(jié)構(gòu)變化,應(yīng)具備該種疾病的主要癥狀和體征,經(jīng)化驗(yàn)或X線照片...
|基因組DNA擴(kuò)增|RNA擴(kuò)增|克隆與表達(dá)克隆基因|克隆試劑盒|克隆篩選|感受態(tài)細(xì)胞|突變轉(zhuǎn)染|轉(zhuǎn)化|體外轉(zhuǎn)錄/翻譯|其它表達(dá)分析Northern印跡分析|分支DNA和mRNA定量|差別基因表達(dá)|反義寡核苷酸|RACE試劑盒|SAGE試劑盒|其它抗體蛋...
充分去除組織表面的血漬和其它異物。2、將組織轉(zhuǎn)入另一無(wú)菌的培養(yǎng)皿,切去多余組織如脂肪或壞死組織,用無(wú)菌刀將組織切成1mm3小塊。3、用無(wú)菌彎頭鑷將組織塊轉(zhuǎn)入50ml的無(wú)菌離心管中,讓組織塊沉淀,吸去多余液體,加入10mlbuffera,充分混勻,300...
痙攣型腦性癱瘓(SCP)大鼠模型【簡(jiǎn)介】痙攣性腦癱指發(fā)育異常引起的運(yùn)動(dòng)和感覺(jué)功能落后,造成肢體肌張力增高、腱反射亢進(jìn)等一系列綜合征。本實(shí)驗(yàn)利用腦立體定位解剖圖譜,對(duì)大鼠的錐體束部位進(jìn)行精確的立體定位,通過(guò)微量注射器對(duì)大腦錐體束所在部位注射無(wú)水乙醇造成錐...
原代細(xì)胞是指在機(jī)體或組織中直接從生物體分離出來(lái)的、未經(jīng)傳代培養(yǎng)的細(xì)胞。這種細(xì)胞保持著其原始的生物學(xué)特性,具有高度的活性和分裂能力。原代細(xì)胞在許多生物醫(yī)學(xué)研究中具有重要地位,包括藥物篩選、疾病模型的建立以及疫苗研發(fā)等。原代細(xì)胞的獲得通常是通過(guò)組織剪切、消...