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芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品
每個(gè)生物實(shí)驗(yàn)室都用得起的單分子免疫檢測(cè)
通過(guò)SiMoA對(duì)酶標(biāo)記物進(jìn)行數(shù)字檢測(cè)的線(xiàn)性動(dòng)態(tài)范圍由區(qū)分“開(kāi)啟”和“關(guān)閉”孔的能力決定。在酶與珠子的比例較低(小于約1:10)時(shí),泊松統(tǒng)計(jì)表明,只有統(tǒng)計(jì)學(xué)上有效果的群體珠子是指含有零和一個(gè)酶的珠子。只要足夠多的珠子被檢測(cè),單個(gè)酶就可以被檢測(cè)到,并且活性珠子的數(shù)量會(huì)超過(guò)泊松分布計(jì)數(shù)活性微球的噪聲。在酶與微球的高比率(大于約(1:10),活性珠子的比例變得更高,泊松統(tǒng)計(jì)表明有大量含有多種酶的微球。為了定量檢測(cè)到的酶的數(shù)量并保持含有多種酶的微球亞群中的線(xiàn)性對(duì)于酶,我們使用泊松統(tǒng)計(jì)法將活性珠子的數(shù)量轉(zhuǎn)換為檢測(cè)到的酶的數(shù)量 單分子 POCT 芯片檢測(cè) IL-6 自動(dòng)版低至 0.5pg/ml,手動(dòng)版 1pg/ml,線(xiàn)性趨勢(shì)良好。POCT數(shù)字ELISA靈活
芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品每個(gè)生物實(shí)驗(yàn)室都用得起的單分子免疫檢測(cè)我們的方法利用了亞飛克爾反應(yīng)室陣列(圖1C)我們稱(chēng)之為單分子陣列(SiMoA)——可以分離和檢測(cè)單個(gè)酶分子20-24。這種方法借鑒了Walt等人20-23的工作陣列用于研究單個(gè)酶的動(dòng)力學(xué)和抑制作用。我們的目標(biāo)是利用捕獲和檢測(cè)單個(gè)酶的能力來(lái)檢測(cè)用酶標(biāo)記的單個(gè)蛋白質(zhì)分子。在這個(gè)單分子免疫測(cè)定的第一步(圖1A),在微球(直徑μm)上形成一個(gè)三明治抗體復(fù)合物,結(jié)合的復(fù)合物用酶標(biāo)記,如同常規(guī)的基于微球的ELISA。當(dāng)測(cè)定含有極低濃度蛋白質(zhì)的樣品,蛋白質(zhì)的比值分子(以及由此產(chǎn)生的酶標(biāo)記復(fù)合物)與微球的比例很?。ㄍǔP∮?:1),因此含有標(biāo)記免疫復(fù)合物的微球百分比遵循泊松分布,導(dǎo)致單個(gè)微球上存在單一免疫復(fù)合物。例如,如果在(3000個(gè)分子)的蛋白質(zhì)中捕獲并標(biāo)記了50μM的蛋白質(zhì),并且在200,000個(gè)微球上進(jìn)行標(biāo)記,則珠子,然后,。無(wú)法檢測(cè)到這些低數(shù)量的酶使用標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)技術(shù)(例如,平板閱讀器)的標(biāo)簽,因?yàn)闊晒馊玖嫌擅糠N酶生成的產(chǎn)物擴(kuò)散到一個(gè)大卵試驗(yàn)體積(通常為),并進(jìn)入其中需要數(shù)十萬(wàn)種酶標(biāo)簽才能產(chǎn)生高于該水平的熒光信號(hào)背景。單分子蛋白數(shù)字ELISA試劑盒芯棄疾JX-8B單分子ELISA檢測(cè)產(chǎn)品,低成本、便捷、快速進(jìn)行微量樣本的檢測(cè);
芯棄疾JX-8B數(shù)字化高靈敏ELISA芯片檢測(cè)產(chǎn)品;應(yīng)用范圍:各種高靈敏多重免疫檢測(cè),可替代各種ELISA試劑盒,及其他免疫檢測(cè)產(chǎn)品。
參考原理:通過(guò)量化異常水平的生物標(biāo)志物來(lái)檢測(cè)新生疾病過(guò)程是診斷和治干預(yù)的關(guān)鍵,以在出現(xiàn)繼發(fā)性臨床癥狀之前進(jìn)行干預(yù)。蛋白質(zhì)和核酸生物標(biāo)志物的發(fā)現(xiàn)和驗(yàn)證已成為生物制藥研究、靶向臨床研究設(shè)計(jì)以及早期疾病診斷追求的主要驅(qū)動(dòng)力。1–4由于蛋白質(zhì)生物標(biāo)志物提供了比核酸更多的下游信息內(nèi)容,因此它們可能作為臨床決策工具具有比較大的潛力。5據(jù)估計(jì),人類(lèi)蛋白質(zhì)組來(lái)源于超過(guò)20,000個(gè)基因,且循環(huán)中有超過(guò)4000種分泌蛋白。6,7這些分泌蛋白中不到十分之一(375種)可以通過(guò)蛋白質(zhì)測(cè)定技術(shù)可靠地測(cè)量。6在這些可測(cè)量的蛋白質(zhì)中,幾乎有一半(171種)已由美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局(FDA)批準(zhǔn)的診斷測(cè)試,8個(gè)指出了蛋白質(zhì)生物標(biāo)志物對(duì)人類(lèi)健康的重要性。
神經(jīng)退行性疾病的超早期診斷突破:?jiǎn)畏肿有酒ㄟ^(guò)檢測(cè)血清中**豐度生物標(biāo)志物(如NfL濃度<1pg/mL、pTau181低至),可在阿爾茨海默癥(AD)臨床癥狀出現(xiàn)前16年發(fā)現(xiàn)病理異常。臨床研究顯示,AD患者血清NfL水平較健康對(duì)照組升高3-5倍(p<),且與腦脊液檢測(cè)結(jié)果高度相關(guān)(r=)。結(jié)合Aβ42/Aβ40比值(閾值<)與Tau蛋白磷酸化位點(diǎn)分析,芯片可精細(xì)區(qū)分AD、路易體癡呆及額顳葉癡呆,診斷特異性達(dá)92%。在藥物研發(fā)中,該技術(shù)用于追蹤抗Aβ單抗***的生物標(biāo)志物動(dòng)態(tài)變化(如Aβ42***率每月提升15%),為劑量調(diào)整與療效評(píng)估提供量化依據(jù)。此外,芯片支持腦脊液替代檢測(cè),通過(guò)血清分析即可實(shí)現(xiàn)無(wú)創(chuàng)監(jiān)測(cè),患者依從性提升50%。 芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA,每個(gè)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室都能用的單分子檢測(cè);
創(chuàng)新性的解決方案:芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA
我公司推出的數(shù)字化高靈敏ELISA芯片檢測(cè)產(chǎn)品應(yīng)用場(chǎng)景:適合生物實(shí)驗(yàn)室、醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室、科研市場(chǎng)、產(chǎn)品預(yù)研、產(chǎn)品開(kāi)發(fā)、ELISA檢測(cè)、動(dòng)物病情檢測(cè)等各種應(yīng)用場(chǎng)景應(yīng)用范圍:各種高靈敏多重免疫檢測(cè),可替代各種ELISA試劑盒,及其他免疫檢測(cè)產(chǎn)品。
根據(jù)目標(biāo)蛋白的抗體制備了功能化的微球生產(chǎn)商說(shuō)明。含有目標(biāo)蛋白的100-μL測(cè)試溶液與200,000個(gè)磁珠懸浮液孵育2小時(shí)至23°C。然后將磁珠分離并用PBS和0.1%Tween-20洗滌三次。磁珠重新懸浮后與含有檢測(cè)抗體(通常約為1nM)的溶液孵育45分鐘。在23°C下最小值。然后將珠子分別用PBS和0.1%洗滌三次。Tween-20。將珠子與含有SβG(1–50pM)的溶液在23°C孵育30分鐘,然后分離并在PBSand0.1%Tween-20中洗滌六次。隨后將珠子重懸于10μLofPBS中,并加載到飛升液位陣列中。整個(gè)實(shí)驗(yàn)的總時(shí)間約為~6小時(shí)。 芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA,每個(gè)生物實(shí)驗(yàn)室都能用的單分子檢測(cè);POCT數(shù)字ELISA檢測(cè)平臺(tái)開(kāi)發(fā)
每個(gè)生物/醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室都用得起的單分子免疫檢測(cè);POCT數(shù)字ELISA靈活
芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA,每個(gè)生物/醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室都用得起的單分子免疫檢測(cè);
單分子的檢測(cè)原理:由Simoa數(shù)字免疫分析法實(shí)現(xiàn)的超靈敏度已在先前討論過(guò)。簡(jiǎn)而言之,類(lèi)似免疫分析中的酶-底物反應(yīng)是在相對(duì)較大的反應(yīng)體積(50-100μL)中進(jìn)行的,在信號(hào)生成步驟中稀釋了產(chǎn)物分子。信號(hào)分子的擴(kuò)散和稀釋將靈敏度限制在皮摩爾范圍內(nèi)。相比之下,Simoa通過(guò)將單獨(dú)標(biāo)記的免疫復(fù)合物和底物限制在飛升大小的孔中,從而限制了熒光產(chǎn)物分子從酶-底物反應(yīng)中的擴(kuò)散。當(dāng)單一酶標(biāo)簽催化底物轉(zhuǎn)化為熒光產(chǎn)物時(shí),產(chǎn)生的熒光團(tuán)被限制在孔中,從而在短時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生可測(cè)量的熒光信號(hào)。 POCT數(shù)字ELISA靈活